Diabetes Melitus Tipe 2 (DM Tipe 2) merupakan penyakit metabolik kronis yang ditandai dengan resistensi insulin dan gangguan metabolisme glukosa. Salah satu gen yang berperan dalam proses transport glukosa adalah Solute Carrier Family 2 Member 4 (SLC2A4) yang mengkode protein Glucose Transporter Type 4 (GLUT-4). Deteksi gen SLC2A4 dapat dilakukan menggunakan metode Polymerase Chain Reaction (PCR), namun keberhasilan amplifikasi sangat dipengaruhi oleh kondisi PCR yang optimal.
Metode penelitian yang digunakan adalah deskriptif dengan tahapan meliputi desain primer menggunakan SnapGene Viewer, isolasi DNA dari sampel darah pasien Diabetes Melitus Tipe 2 dengan metode kit ekstraksi, pengukuran konsentrasi dan kemurniaan DNA, serta optimasi PCR antara lain yaitu optimasi suhu annealing dengan variasi gradien suhu pada rentang 62°C – 54,6°C berdasarkan rentang suhu annealing standar yang baik serta nilai Temperature Melting (Tm) dari primer yang digunakan dan optimasi konsentrasi primer dengan konsentrasi yang digunakan yaitu 0,1 μM; 0,5 μM; 1,0 μM. Hasil kemudian diamati melalui elektroforesis gel agarose 1%.
Berdasarkan hasil penelitian, isolasi DNA menunjukkan adanya pita DNA pada sumuran dengan ukuran lebih dari 10.000 pb. Hasil elektroforesis gel agarosa pada optimasi kondisi amplifikasi gen SLC2A4 dari penderita Diabetes Melitus Tipe 2 menunjukkan bahwa suhu annealing optimal terdapat pada suhu 62°C dan konsentrasi primer optimal pada 0,5 μM, yang menghasilkan pita DNA target dengan intensitas paling tebal dan spesifik. Kondisi optimal tersebut dapat digunakan sebagai acuan dalam amplifikasi gen SLC2A4 menggunakan metode PCR pada penelitian selanjutnya.

Type 2 Diabetes Mellitus (T2DM) is a chronic metabolic disease characterized by insulin resistance and impaired glucose metabolism. One of the genes involved in glucose transport is Solute Carrier Family 2 Member 4 (SLC2A4), which encodes the Glucose Transporter Type 4 (GLUT-4) protein. Detection of the SLC2A4 gene can be performed using the Polymerase Chain Reaction (PCR) method; however, successful amplification is highly influenced by optimal PCR conditions.
The research method used was descriptive, consisting of primer design using SnapGene Viewer, DNA isolation from blood samples of Type 2 Diabetes Mellitus patients using the extraction kit method, measurement of DNA concentration and purity, and PCR optimization including annealing temperature optimization using gradient temperatures ranging from 62°C–54.6°C based on the standard annealing temperature range and the melting temperature (Tm) value of the primers used, as well as primer concentration optimization using concentrations of 0.1 μM, 0.5 μM, and 1.0 μM. The results were then observed using 1% agarose gel electrophoresis.
Based on the results, DNA isolation showed the presence of DNA bands in the wells with sizes greater than 10,000 bp. Agarose gel electrophoresis results in the optimization of SLC2A4 gene amplification conditions from Type 2 DM patients showed that the optimal annealing temperature was 62°C and the optimal primer concentration was 0.5 μM, producing the thickest and most specific target DNA bands. These optimal conditions can be used as a reference for SLC2A4 gene amplification using the PCR method in future studies.